苏木精-伊红染色（HE染色）

HE染色是一种以形态为基础，结合应用化学技术对组织、各种细胞进行染色的实验技术，用于研究组织细胞的生理、病理和化学结构。
基本原理：去氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中称蓝色，所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。

一般染色组织切片厚度为3µm左右，中枢神经系统6～8µm，肾小球基底膜染色观察时要求1.5～2µm标准厚度。

一、石蜡切片
1  60℃预热10～20分钟。
2  常规脱蜡水合：二甲苯5分钟，2次→无水乙醇5分钟，2次→95％乙醇5分钟，2次→75％乙醇5分钟1次→ddH2O 5分钟1次。
3  苏木素复染1-10分钟，显微镜下掌控。
4  ddH2O洗。
5  1％盐酸酒精分化。
6  ddH2O返蓝。
7  1％伊红溶液染色，显微镜下掌控。
8  ddH2O洗。
9  脱水，透明，中性树胶封片。

二、细胞爬片
1  将细胞种于干净盖玻片上。
2  PBS洗细胞3次，5分钟/次。
3  4%甲醛固定30分钟。
4  PBS洗 3次，5分钟/次。
5  苏木素染色1～5分钟，显微镜下掌控。
6  水洗返蓝。
7  1％盐酸酒精分化（视情况决定是否进行此步操作）。
8  1％伊红溶液染色20分钟，显微镜下掌控。
9  脱水，透明，封片。

染色结果：细胞核被苏木素染成蓝色。细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被伊红Y染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。