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DNA测序

来源: 时间:2010-9-24 0:15:05 点击: 今日评论:

BigDye测序
    DNA测序采用的是ABI公司的BigDye Terminator v3.1 cycle Sequencing Kit,在ABI 3730xl 遗传分析仪平台上进行,可以提供高通量、高质量的测序结果。
 
    
   
Solexa测序
    以 Illumina公司的Solexa Genome Analyzer 为新一代革新性技术分子生物学综合技术平台,同传统的Sanger测序方法相比,无论在通量上还是成本上都具有明显优势。可以同时完成传统基因组学研究 (测序和注释)以及功能基因组学 (基因表达及调控,基因功能,蛋白/核酸相互作用)研究。包括:基因组测序、基因表达谱分析、小RNA(small RNA)测序、CGH 分析。
 
  


    
    BigDye测序样本类型及要求
    1. 未纯化PCR产物
    要求浓度: 100ng/ul * 30ul ; 引物浓度 10pm * 10ul/反应
    2. 已纯化的PCR产物
    要求浓度:20-50ng/ul * 10ul以上
    尽量用水洗脱,要求洗脱后检测唯一条带
    3. 质粒
    要求无RNA 条带(否则需要加RNA酶处理,影响后续反应)
    浓度20-50ng/ul * 10ul以上/每个反应,电泳检测有条带即可
    4. 菌液
    新鲜的菌液50ul
    不带甘油,含有甘油的客户自行活化重新摇菌送样
    穿刺,平板都可以

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