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实验方法
>> DNA
核酸杂交
核酸杂交是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。其原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开，而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双边结构。杂交通常在一支持膜......
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发表于：
2009-5-11
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关于ELISPOT试验技术中对细胞的
一、提取外周血淋巴细胞时注意事项 如果取外周血淋巴细胞 (PBMC) 进行ELISPOT检测，最好采用新鲜血液。在保证无菌操作的前提下，首先应保证取血时抗凝剂应及时充分的与血液混匀，避免血凝块的出现。抗凝血最好及......
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发表于：
2008-12-22
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克隆技术发展历程
1997年2月22日，英国罗斯林研究所的研究人员向公众宣布，经过几个月的精心呵护，他们用体细胞克隆技术培育出来的小绵羊“多利”正在茁壮成长。5天后，也就是2月27日，英国《自然》杂志全文刊登了......
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发表于：
2008-12-22
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琼脂糖凝胶回收
从琼脂糖凝胶中回收DNA ，是一种简单不过的常规实验操作。但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验――比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等，所以这一步的操作也显得非常......
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2008-12-22
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DNA重组实验中常用的技术(一）
（一）质粒DNA 的提取及鉴定 1．收获细菌 （1）将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中，接入一单菌落，于37℃剧烈振荡培养过夜。 （2）将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中，用台式离心机于......
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2008-12-22
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细菌基因组DNA的微量提取法
本方法通过SDS裂解细胞，蛋白酶降解蛋白 ，CTAB去除多糖成分。 一：仪器：同方法一 二：试剂：TE、TAE缓冲液；10%SDS；5M NaCL； 20mg/ml蛋白 酶K；CTAB/NaCL溶液(10% CTAB，0.7M NaCL 4.1gNaCL 溶于80m......
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2008-12-22
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DNA分子的限制性内切酶消化
限制性内切酶可特异地结合于一段被称为限制酶识别序列的DNA 序列位点上并在此切割双链DNA 。绝大多数限制性内切酶识别长度为4、5或6个核苷酸且呈二重对称的特异序列，切割位点相对于二重对称轴的位置因酶而异。一些......
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2008-12-22
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限制性内切酶质量控制(Restricti...
单位定义 限制性内切酶的一个活性单位是指，在50μl 的反应体系里，采用随酶提供的 NEBuffer，用1个小时的时间，彻底消化1μg底物DNA所需要的酶量。 酶切反应应在带盖的Eppendorf 管中进行，选用技术数据卡......
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2008-12-22
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基因分离克隆的方法
1 基因芯片技术分离目的基因 生物芯片是高密度固定在固相支持介质上的生物信息分子的微列阵。列阵中每个分子的序列及位置都是已知的，并按预先设定好的顺序点阵。基因芯片是生物芯片的一种，其上固定的是核算类物......
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2008-12-22
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酵母菌基因组DNA的提取
酵母 菌基因组 DNA的提取 一：仪器： 同方法一 二：试剂： SE缓冲液（1M山梨醇，0.1MEDTA pH7.5）；溶菌酶（50mg/ml）；20％PVP；蛋白酶K缓冲液（10mM Tris pH7.6 0.5% SDS 1mM EDTA）；其余同前 三：操......
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发表于：
2008-12-22
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