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实验方法
>> 遗传工程
DNA提取中的常见问题分析
提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰, DNA质量一直不高,如何消除多糖的影响? 参考见解:一般来说,SDS法提取的DNA会还有较多的多糖,使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较......
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发表于:
2009-1-6
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从精子中提取DNA的方法
步骤: 1、从棉签上取下有检材的棉花并置于1.5塑料离心管中。 2、管中加入400微升TNE缓冲液;25%微升sarcosyl(硅鱼精);75微升水;5微升蛋白酶K溶液手混匀,37度保温2小时。 3、用一新的灭菌牙签将棉花拧干......
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发表于:
2009-1-6
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质粒DNA的提取与纯化
一、实验目的与原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本......
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发表于:
2009-1-6
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5
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提取λ噬菌体DNA
λ噬菌体是最早使用的克隆载体,λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径,其一是裂解生长,环状DNA分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体......
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2009-1-6
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DNA酶切实验(图)
采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单,但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同(主要是盐离子浓度不同)或反应温......
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2009-1-6
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DNA连接试验
当我们已经获得目的基因片段,选择好适当的克隆(或表达,转化)质粒载体, 并确定重组方案后,下面要进行的就是DNA片段之间的体外连接,从而获得重组子。 此重组子可转入相应的宿主菌中用于对目的基因的扩增以......
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2009-1-6
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DNA连接反应的影响因素
1、 连接缓冲液的影响:大体上缓冲液含有以下组分:20-100mmol/L的Tris-HCl,较多用50mmol/L,pH的范围在7.4-7.8,较多用7.8,目的是提供合适酸碱度的连接体系;10mmol/L的MgCl2,作用是激活酶反应;1-20mmol/L的D......
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2009-1-6
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果蝇实验技术
一、实验原理 果蝇(fruit fly)是双翅目(Diptera)昆虫,属果蝇属(genus Drosophila),约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。用果蝇作为实验材料有许多优点: 1. ......
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2009-1-6
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孟德尔豌豆实验(图)
上图描述了孟德尔的经典实验之一,这里他用豌豆杂交实验说明了他的遗传概念。 孟德尔认为子一代的遗传性状来自于亲代父本和母本,然后再把这些性状传给子二代,而不是在子代那里混合起来的。 纯合的父本(圆豌......
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2009-1-6
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人类X染色质的观察
一、 实验目的 掌握观察与鉴别X染色质的简易方法,识别其形态特征及所在部位,为进一步研究人体染色体的畸变与疾病提供参考条件。 二、 实验原理 1、发现 1949年,加拿大学者Barr等人在雌猫的神经元细胞核......
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发表于:
2009-1-6
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