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实验方法
>> 蛋白技术
常见蛋白质等电点参考值
蛋白质 等电点 鲑精蛋白[salmine] 12.1 鲱精蛋白[clupeine] 12.1 鲟精蛋白[sturline] 11.71 胸腺组蛋白[thymohistone] 10.8 珠蛋白(人)[globin(human)] 7.5 卵白蛋白[ovalbuin] 4.71;4.59 伴清蛋白[conal ......
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发表于:
2009-6-10
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双向电泳样品制备方法
双向电泳可不是一件容易的差事,花银子花时间不说,结果还很难重复。想要搞定双向电泳,关键在于建立一套有效、可重复的样品制备方法。方法是多种多样的,不过都基本遵循以下的原则: 1. 样品缓冲液中离子浓度的......
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发表于:
2009-6-10
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几个常用蛋白质分析网站
几个常用蛋白质分析网站,分享一下! 从氨基酸组成辨识蛋白质 ExPASy:http://www.expasy.ch/tools/ PROSEARCH:http://www.embl-heidelberg.de/prs.html 预测蛋白质的物理性质:等电点、分子量、酶切特性、疏......
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发表于:
2008-12-17
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纯化全长/高纯度蛋白方法(Doubl
Protein表达是一个非常复杂的过程,因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件,在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。 蛋白含有两种......
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2008-12-17
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现代生物分离技术在多肽蛋白质分
一、前言 随着基因工程和细胞工程的发展,尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生产中广泛应用,并显示出优良的分离性能,但它难以提取和分离蛋白质。其主要原因有两个: 被分离对象—&......
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2008-12-17
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SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白
一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质......
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2008-12-17
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蛋白质提取与纯化技术
选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物......
作者:
发表于:
2008-12-17
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5
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蛋白质的提取技术
选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物......
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2008-12-17
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聚丙烯酰胺凝胶层析(PAGE)的技
大分子核酸的检测通常使用琼脂糖凝胶层析,但是由于其分辨率不够,所以检测小分子核酸使用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)层析,分辨率可以达到几个bp。对于PAGE胶的一些技术参数罗列如下表: ......
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2008-12-17
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优化基因表达的关键因素
在基因表达研究中,研究者比较注意选择合适的表达载体和宿主系统,而往往忽视基因本身是否与载体和宿主系统为最佳匹配这样一个实质性问题。基因的最佳化表达可以通过对基因的重新设计和合成来实现,如消除稀有密码......
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2008-12-17
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